附件2-非酒精性脂肪性肝炎的血清新型标记物ELISA检测及临床应用.pdf

附：公示内容（需包括如下方面） 项目名称：非酒精性脂肪性肝炎的血清新型标记物 ELISA 检测及临床 应用 申报奖种：华夏医学科学技术奖 完成单位：天津医科大学第二医院 完成人（含排序）：江勇、季英兰、张颖、翟浩宇、齐凤祥、李熳、 张志广、闻淑军、卢向东、赵建秋 项目简介（600—1200 字，与申报推荐书“项目简介”一致）： 非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD） 包括非酒精性单纯性脂肪肝（nonalcoholic simple fatty liver, NAFL）、 非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis, NASH）及其相关肝 硬化和肝细胞癌。近年来随着生活水平的提高和饮食结构的改变，NAF LD 的发病率越来越高，逐渐引起人们的重视，已成为我国愈来愈重要 的慢性肝病。世界范围内 NAFLD 的平均患病率为 20%-33%，其中 NASH 的患病率占 10%-20%，25%-35%的 NASH 患者会进展为肝纤维化，其中 9% -20%患者发展成肝硬化，最终 40%-60%的肝硬化患者在 5-7 年后可出现 肝衰竭或进展为原发性肝癌。因此，积极诊断、防治 NAFLD，尤其是 NA SH，对预防疾病进展和改善预后有着十分重要的意义。但目前为止，早 期诊断、早期治疗 NASH 尚缺乏有效的手段。如何能延缓 NASH 的进展甚 至逆转这一过程一直是人们关注的热门话题。胸腺素β4(Thymosinβ4， Tβ4)是由胸腺产生的一种淋巴生长因子，它是由 43 个氨基酸残基组成 的多肽，在哺乳动物中高度保守，Tβ4 普遍存在于各种真核细胞中，在 人脾脏、胸腺、肺和腹膜巨隨细胞中其含量最高，其次是脑、肝、肾脏、 睾丸和心脏，Tβ4 是人体内主要的肌动蛋白调节分子之一，具有多重生 物学功能，在组织再生、重塑、创伤愈合、维持肌动蛋白平衡、肿瘤发 生与转移、细胞凋亡、炎症、血管生成和毛囊发育等生理与病理过程中 扮演着极为重要的角色。本团队自 2015 年起，开始关注 Tβ4 在 NASH 的诊断与治疗中的作用， 发现血清中的 Tβ4 可 NASH 诊断的生物标志物， 动物模型也初步发现，Tβ4 可改善 NASH 模型小鼠的肝功能，降低肝脏 NAS 评分，具体包括： 1）发现血清中的 Tβ4 可作为 NASH 诊断的生物标志物。发现血清 Tβ4 在 NASH 患者中的表达较单纯脂肪肝明显减少，二者比较有统计学意义 (P <0.001)，当 cut-off 值为 4.19mg/L 时，ROC 曲线图显示曲线下面积 （AUC）为 0.828，灵敏度为 85.7%，特异度为 62.5%；Tβ4 的减少与体 内氧化应激状态（8-羟基脱氧鸟苷酸，8-OHdG）关系密切。 2）发现在血清中的 Tβ4 可能对 NAFLD 中起保护作用。对比 NAFLD 患者 与健康人群中 Tβ4 的表达情况，发现血清中 Tβ4 的表达与脂联素、IG F-1 的表达成正相关性，与 HOMA-IR、IL-6、TNF-a 呈负相关性。 3）发现 Tβ4 可改善 NASH 模型小鼠的肝功能，降低肝脏 NAS 评分。本 研究构建了 NAFLD 动物模型进一步验证，发现经 Tβ4（0.05mg/Kg.d、0. 20mg/Kg.d，腹腔注射）治疗 8 周后的 NAFLD 小鼠，其病理组织学(HE 染色)及 NAS 评分均明显好转，高剂量 Tβ4 组γ-GGT 等肝功能指标较模 型组明显降低（P<0.05），其治疗作用确切。为研究 Tβ4 的作用机制， 我们通过建立 NAFLD 动物模型发现肝脏组织中高剂量 Tβ4 组 Tβ4、TN F-a、IL-1β、GSDMD 蛋白的相对表达量均低于 NAFLD 组，且差异均有统 计学意义(P 均<0.05)，证明 Tβ4 对肝细胞的焦亡确实存在抑制作用。 根据 NAFLD 动物模型，还发现高剂量 Tβ4 组 NF-κBp65 相对表达水平 低于 NAFLD 组，而 IκBa 相对表达水平高于 NAFLD 组，推测 Tβ4 对 NA FLD 的治疗作用可能是通过抑制 NF-κB 通路发挥作用。 研究成果已发表文章 10 篇（SCI 4 篇，中华系列文章 5 篇，中文核 心文章 1 篇），并在天津、重庆、广州、西藏的 4 所三甲医院做临床推 广，取得了良好的效果；同时，并受邀在天津市肝脏病学年会（2016 年、2017 年）、2017 年肝病免疫学高峰论坛（上海交通大学主办）做 口头发言。 主要知识产权证明目录： （与申报推荐书“主要知识产权证明情况表”） 一致） 知识产 权类别 知识产权 具体名称 国家 授权 （地区） 号 授权 日期 胸腺素β4 在非酒 2017. 精性脂肪性肝炎诊 中国 11.17 证书编号 成果 登记 断中意义 20171121 权利 人 发明 人